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干細胞血清如何解凍才不會受損?

  • 發(fā)布日期:2020-04-15      瀏覽次數:965
    •    某些細胞必需干細胞血清才能生長,而有些細胞只需小牛血清即可。血清一般儲存于-20℃的溫度條件,同時應避免反復凍融。若存放于4℃時,請勿超過一個月。
        干細胞血清中絮狀沉淀的處理:
        沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白,這是正常特性,不會影響產品性質。離心血清(400g,1-2分鐘)或簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾。
        血清使用濃度一般為5-20%,常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細胞系,迅速生長之后容易發(fā)生惡性轉化。
        如何解凍血清才不會使其產品質量受損?
        將干細胞血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻。解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
        解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
        請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
        混合型干細胞血清保存方法:
        血清應保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。
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